尿游离皮质醇

目录

1 拼音

niào yóu lí pí zhì chún

2 英文参考

urinary-free cortisol

3 概述

尿游离皮质醇由血液中游离皮质醇经肾小球滤过而来,因此基量与血浆中真正具有生物活性的游离皮质醇成正比。测定尿游离皮质醇可以有效、正确地反映肾上腺皮质的功能状态。留取24h尿量,用10ml冰醋酸作防腐剂。

4 尿游离皮质醇的医学检查

4.1 检查名称

尿游离皮质醇

4.2 分类

体液和排泄物检查 > 尿液检查

4.3 取材

尿液

4.4 尿游离皮质醇的测定原理

皮质醇为肾上腺皮质所分泌的糖皮质激素,标记抗原与样品中的抗原对特异抗体产生竞争抑制反应,当加入标记抗原和抗体的量恒定时,则带标记的结合物形成与抗原的含量成反比,根据标准曲线求出样品的含量。

4.5 试剂

(1)0.1mol/L pH7.0磷酸-氯化钠缓冲液(PBS)0.2mol/L NaH2PO4·2H2O 100ml,0.2mol/LNa2HPO4·12H2O 400ml,NaCl 9g,加水至1000ml。

(2)1g/L明胶-磷酸缓冲液(W/V):简称1g/LGPS,贮于4℃。

(3)5g/L明胶-磷酸缓冲液(W/V):简称5g/LGPS,贮于4℃。

(4)2.5g/L DCC溶液:葡聚糖T70250mg,溶于PBS 100ml,加活性炭NoritA2.5g,搅拌或振摇1h,贮于4℃,使用时再用PBS10倍稀释。

(5)闪烁液:对联三苯(TP)4g,1.4-双-2-(5-苯基噁唑基)苯(POPOP)125mg,醋酸乙酯250ml,二甲苯1000ml,室温避光保存。

(6)抗体:皮质醇-C21-牛血清白蛋白为抗原免疫家兔,抗体的工作液浓度为1∶3800,对皮质酮和17-羟孕酮的交叉分别为10%和17%。

(7)氚标皮质醇:[1,2-3H]皮质醇,比活性(SA)=148×1016Bq/mmol(40Ci/mmol),放化纯度>95%。工作液用无水乙醇配成7000cpm/10μl,密封,贮存于4℃。

(8)皮质醇标准液:上海第九制药厂层析纯,工作液用无水乙醇配成2ng/100μl,密封,4℃保存。

4.6 操作方法

(1)尿样品测定:取万分之一的24h混合尿,用蒸馏水稀释至0.5ml,于10ml抽提管中,加二氯甲烷5ml和0.1mol/L NaOH 0.2ml,抽提5min,静止片刻弃去上层液,下层二氯甲烷抽提液用水洗2次,每次1ml,摇1min,离心1500r/min 3min,弃去水层,取二氯甲烷提取液双份各1ml(复管),45℃压缩空气吹干,加3H-皮质醇7000cpm/10μl,45℃吹干,各管加0.2ml抗体应用液(1∶3800用1g/L GPS稀释),摇匀置4℃过夜,以下步骤同标准管。

(2)标准曲线制作:0,0.1,0.3,0.6,1.0,2.0,4.0ng(各点做复管),各管加3H-皮质醇10ml,吹干,每管加抗体0.2ml,另取四管各加3H皮质醇10ml,分别加1g/L GPS 0.7和0.2ml其中二管作总脉冲测定管,另二管作非特异性测定(BN%)摇匀后,放4℃过夜。次日各管加5g/L GPS 0.1ml摇匀,再加2.5g/L DCC 0.5ml(总管T不加)。分离游离与结合物;摇匀4℃停放10min,3000r/min离心10min吸取上清液0.4ml,加到8ml闪烁液中,混旋1min,避光4h后,用液烁计数仪测量。

4.7 正常值

成人:206.9±44.1nmol/24h 尿 (范围129.7~303.6)

4.8 化验结果临床意义

(1)皮质醇增多增多症:血浆和尿皮质醇明显升高,血浆昼夜节律变化消失。

(2)异位产生ACTH的肿瘤:如燕麦型肺癌、胰、甲状腺、甲状旁腺、卵巢、睾丸、大肠、胆囊、乳腺、以及纵膈瘤等这种癌肿组织具有分泌ACTH样物质的功能,使促肾上腺皮质合成皮质醇,血浆中皮质醇则显著升高。

(3)垂体前叶机能亢进症:由于垂体前叶促激素的大量分泌,靶腺增生,血浆和尿皮质醇可升高。

(4)肾上腺皮质功能低下,如阿狄森、西蒙、席汉综合征,血浆和尿皮质醇含量减少。

(5)长期使用类固醇激素可通过负反馈抑制ACTH分泌,使肾上腺皮质处于抑制或萎缩、则血浆和尿皮质醇含量减少。

(6)单纯性肥胖、血浆和尿皮质醇含量略高或正常范围内。

(7)先天性肾上腺皮质增生症,因体内缺少某种酶如C20-22断裂酶3β-脱氢酶、17α-羟化酶11β羟化酶和18羟化酶等使皮质醇合成障碍,而皮质醇产生减少。

4.9 附注

(1)各管加入3H或标准必须吹干,然后加抗体,因为3H或标准是乙醇配制,否则会损害抗体。

(2)加定量的3H须根据实验情况而定(本文加7000cpm),在相应的范围内3H抗原加入量越少灵敏度就越高。

4.10 相关疾病

肺癌、先天性肾上腺皮质增生症

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